Прогностическое значение ультраструктурного исследования сперматозоидов при нарушениях фертильности мужчин


The Presentation inside:

Slide 0

Прогностическое значение ультраструктурного исследования сперматозоидов при нарушениях фертильности мужчин Брагина Е.Е. Курило Л.Ф. Кущ А.А. Гусак Ю.К. Шилейко Л.В. Бочарова Е.Н.


Slide 1

Сперматогенез Сперматогонии Сперматоцит I порядка (2n) Сперматоциты II порядка Сперматиды (n) Зрелые сперматозоиды Митоз 1-е деление мейоза 2-е деление мейоза


Slide 2

Сперматогонии, сперматоциты и сперматиды в клетках сертоли


Slide 3

Структура нормального сперматозоида Спермиогенез (по de Kretser, Kerr, 1988) Акросома Конденсированный хроматин Шейка Митохондрии Аксонема жгутика Типичный сперматозоид. Растровый электронный микроскоп.


Slide 4

Строение соединительного участка жгутика сперматозоида Остаток дистальной центриоли Проксимальная центриоль


Slide 5

Структура жгутика типичного сперматозоида Продольный (вверху слева) и поперечный (внизу слева) срезы через жгутики типичных сперматозоидов


Slide 6

Дифференциальная диагностика генетически обусловленных и неспецифических форм патоспермии


Slide 7

Аномалии строения сперматозоидов, которые могут иметь генетическую природу 1. Первичная цилиарная дискинезия у мужчин с астенозооспермией. Поражаются структуры аксонемы (микротрубочки, динеиновые ручки). Кандидатные гены - DNAH5, DNAH11, DNAI1 и др.. 2. Дискинезия фиброзного слоя у мужчин с астенозооспермией. Разрушение вертикальных столбиков и поперечных ребер фиброзного слоя. Кандидатные гены – гены семейства AKAP. 3. Глобулозооспермия у мужчин с тератозооспермией. Агенез акросомы. Кандидатные гены - GOPC, Ck2. 4. Синдром ацефалических сперматозоидов у мужчин с тератозооспермией. Аномалия базального тельца. 5. Локальное или тотальное отсутствие митохондрий в среднем отделе жгутика. Кандидатный ген – Hst локус t комплекса.


Slide 8

Агенез акросомы и деконденсированный «незрелый» хроматин у пациентов с глобулозооспермией Гранулярный «незрелый» хроматин Тотальный агенез акросомы в сочетании с незрелым хроматином и округлой формой головки (глобулозооспермия). Обнаружен у 2% пациентов с нарушением фертильности.


Slide 9

Первичная цилиарная дискинезия у пациентов с тотальной астенозооспермией Поперечные срезы через средний отдел атипичных жгутиков сперматозоидов из эякулята пациентов с тотальной астенозооспермией. Прогноз фертильности неудовлетворительный. Пациенты с первичной цилиарной дискенезией составляют около 2% всех пациентов с астенозооспермией.


Slide 10

Жгутик нормального сперматозоида (слева) и жгутик сперматозоида пациента с тотальной астенозооспермией, вызванной дисплазией фиброзного слоя жгутика (справа). Кандидатные гены – гены семейства AKAP Фиброзный слой


Slide 11

Поперечные срезы проксимальной центриоли жгутика типичного сперматозоида (слева) и центриоли с разрушенными триплетами (справа - стрелки)


Slide 12

Характеристика специфической «синдромной» патологии сперматозоидов 1. Атипия носит либо тотальный характер, либо составляет абсолютное большинство в клеточной популяции образца. 2. Количество сперматозоидов с атипичным фенотипом не корректируется после лечения. 3. Отмечается семейный характер атипичного фенотипа сперматозоидов. 4. Аналогичный атипичный фенотип может быть обнаружен у других пациентов с той же патологией. Причиной «синдромной» патологии, по-видимому, являются точечные мутации, не связанные с изменениями кариотипа.


Slide 13

Выявление неспецифической патоспермии при идиопатическом нарушении фертильности мужчин


Slide 14

Характерные черты «неспецифической» патоспермии 1)гетерогенность атипий сперматозоидов; 2) отсутствие семейного характера атипичного фенотипа; 3) возможность терапевтической коррекции. Неспецифическая патоспермия часто является результатом цитотоксического действия андрологических заболеваний, либо других эндогенных или экзогенных факторов. Количественные значения параметров патоспермии определены у пациентов фертильной группы, содержание сперматозоидов с различными типами аномалий повышается у пациентов с нарушением фертильности.


Slide 15

Неспецифическая патозооспермия у пациентов с идиопатическим нарушением фертильности 1) повышенное содержание сперматозоидов с нарушением конденсации хроматина (35% пациентов); 2) гипоплазия и деградация акросомы (14% и 16% пациентов, соответственно); 3) гиперпродукция мембран ядерной оболочки в постакросомальном районе головки и формирование аутосом в цитоплазматической капле сперматозоидов (18% пациентов); 4) наличие отечных митохондрий с электронно-прозрачнгым матриксом и вакуолизированными кристами в среднем отделе жгутика и нарушение укладки митохондрий (18% и 7% пациентов, соответсвенно); 5) нуклеокапсиды вируса простого герпеса обнаружены в сперматозоидах 7% пациентов с нормозооспермией в сперматозоидах, у 6) колонии микроорганизмов, часто окруженные мембранными структурами выявлены у 9% пациентов. Нормозооспермия определена у 28% пациентов.


Slide 16

Нарушение конденсации хроматина более чем в 30% сперматозоидов может быть причиной идиопатического бесплодия при нормальных показателях спермограммы, приводить к спонтанным абортам в первом триместре при беременности с естественным.зачатием. При использовании метода SUZI и ИКСИ снижается частота оплодотворения. Выявлено у 35% пациентов с идиопатическим бесплодием.


Slide 17

Аномалия морфологии акросомы вызывает нарушение пенетрационной функции Гипоплазия акросомы Деградация акросомы Гипоплазия акросомы может быть причиной идиопатического бесплодия. Гипоплазия выявлена у 14% пациентов с идиопатиеским нарушением фертильности, деградация акросомы – у 16%.


Slide 18

Гиперплазия мембран ядерной оболочки сперматозоидов. Выявлена у 18% пациентов с идиопатическим бесплодием Многослойные мембраны ядерной оболочки


Slide 19

Нарушение строения митохондрий Митохондрии с электронно-прозрачным матриксом выявлены у 18% пациентов с идиопатическим нарушением фертильности. Нарушение строения митохондриальной спирали выявлено у 7% пациентов.


Slide 20

Результаты количественного ультраструктурного исследования половых клеток пациента Н. до и после лечения


Slide 21

Вирусное инфицирование сперматозоидов Продольный срез через средний отдел жгутика сперматозоида (слева) и фрагмент поперечного среза (справа). В цитоплазматической капле обнаруживаются нуклеокапсиды вируса простого герпеса (ВПГ). Природа вируса подтверждена положительным результатом реакции иммунофлюоресценции с антителами к ВПГ. Аксонема жгутика Нуклеокапсиды вируса простого герпеса


Slide 22

Сперматозоиды, инфицированные вирусом простого герпеса Реакция иммунофлюоресценции (моноклональные антитела к белкам вируса простого герпеса)


Slide 23

1. Из эякулята пациентов без симптомов генитального герпеса могут быть выделены инфекционные вирионы вируса простого герпеса (ВПГ). 2. В ряде случаев при отсутствии в эякуляте инфекционных вирионов ВПГ в ядрах головок сперматозоидов определяется вирусная ДНК, а в цитоплазматической капле – вирусные белки (сперматозоиды являются носителями ВПГ). 3. Подвижные сперматозоиды типичной морфологии могут быть инфицированы (быть носителями) ВПГ. ВОПРОС: могут ли инфицированные сперматозоиды участвовать в оплодотворении и какова в этом случае судьба эмбриона? (Брагина и соавт., 2000; 2001; 2003)


Slide 24

Микробное загрязнение эякулята В эякуляте 9% пациентов выявлены микроорганизмы, в большинстве случаев покрытые плотной микрокапсулой


Slide 25

Микрофлора эякулята Колония дрожжеподобных грибов Микроколония дрожжеподобных грибов расположена внутри полимембранных структур Мембраны, окружающие колонию грибов


Slide 26

Области применения метода количественного электронно-микроскопического анализа половых клеток при нарушениях фертильности мужчин 1. Дифференциальная диагностика генетически детерминированных («синдромных») и неспецифических форм патоспермии. 2. Выявление форм неспецифической патоспермии при идиопатическом нарушении фертильности мужчин. 3. Прогнозирование результатов ВРТ (определение индекса интактных сперматозоидов с типичной ультраструктурной организацией. Специфичность метода – 75% (Berkovitz et al., 1999; Baccetti et al., 2002).


Slide 27

Благодарим за внимание! Наш адрес в интернете: www.spermatolog.ru Телефоны: +7 495 931 7211 +7 903 556 4263 Прием пациентов: КЛЦ «Пастер» 124-87-44 МГНЦ РАМН 111-85-92


×

HTML:





Ссылка: